Ahoana no fisafidianana ny "thermal cycler" mety amin'ny filànao fikarohana

Mpandrindra hafananafitaovana tena ilaina raha ny momba ny biolojia molekiola sy ny fikarohana momba ny fototarazo. Fantatra ihany koa amin'ny hoe milina PCR (polymerase chain reaction), ity fitaovana ity dia tena ilaina amin'ny fanamafisana ny ADN, ka mahatonga azy io ho vato fehizoron'ny fampiharana isan-karazany ao anatin'izany ny cloning, ny sequencing ary ny famakafakana ny fanehoan-kevitry ny fototarazo. Na izany aza, misy safidy maro eny an-tsena ka mety ho asa sarotra ny fisafidianana ny cycler mafana mety amin'ny filanao fikarohana. Ireto misy lafin-javatra fototra tokony hodinihina rehefa misafidy ianao.

1. Fantaro ny zavatra takinao amin'ny fikarohana

Alohan'ny hidiranao amin'ny famaritana ny karazana fitaovana fandrefesana hafanana samihafa, dia zava-dehibe ny manombana ny filànao manokana amin'ny fikarohana. Eritrereto ny karazana andrana hataonao. Mampiasa PCR mahazatra ve ianao, sa PCR quantitative (qPCR), sa fampiharana avo lenta? Ny tsirairay amin'ireo fampiharana ireo dia mety mitaky endri-javatra sy fahaiza-manao samihafa amin'ny fitaovana fandrefesana hafanana.

2. Elanelana sy fitoviana amin'ny mari-pana

Ny mari-pana ao amin'ny "thermal cycler" dia singa tena ilaina. Ny ankamaroan'ny protocole PCR dia mitaky dingana denaturation eo amin'ny 94-98°C eo ho eo, dingana annealing amin'ny 50-65°C, ary dingana extension amin'ny 72°C. Ataovy azo antoka fa mahazaka ireo mari-pana ireo ny "thermal cycler" fidinao ary mizara mitovy tsara ny mari-pana manerana ny môdely. Ny tsy fitoviana amin'ny mari-pana dia mety hisy fiantraikany amin'ny fikarohanao amin'ny alàlan'ny famoahana vokatra tsy mitovy.

3. Endrika sy fahafaha-mitahiry sakana

Misy endrika modular isan-karazany ny "thermal cycler", anisan'izany ny takelaka 96-wells, takelaka 384-wells, ary na dia takelaka 1536-wells aza. Tokony hifanaraka amin'ny filanao ny safidin'ny endrika bloc. Raha manao andrana avo lenta ianao dia mety mila endrika bloc lehibe kokoa. Mifanohitra amin'izany kosa, ho an'ny andrana kely kokoa dia mety ho ampy ny takelaka 96-wells. Fanampin'izany, diniho raha mila môdely azo ovaina amin'ny endrika samihafa ianao, satria izany dia afaka mampitombo ny fahafahan'ny fikarohanao ampiasaina.

4. Hafainganam-pandeha sy fahombiazana

Ao anatin'ny tontolon'ny fikarohana haingam-pandeha ankehitriny, tena ilaina ny fotoana. Mitadiava fitaovana fandrefesana hafanana manana fahaiza-manafana sy fampangatsiahana haingana. Ny modely mandroso sasany dia afaka mamita ny tsingerin'ny PCR ao anatin'ny 30 minitra latsaka, ka manafaingana be ny fizotran'ny asanao. Ho fanampin'izany, ny endri-javatra toy ny fomba haingana na ny tahan'ny fanafanana haingana dia mampitombo ny fahombiazana, ahafahanao mikirakira santionany bebe kokoa ao anatin'ny fotoana fohy kokoa.

5. Interface sy Rindrambaiko ho an'ny Mpampiasa

Ilaina ny interface mora ampiasaina mba hampandeha tsara ny asa. Mitadiava "thermal cycler" misy efijery tactile mora ampiasaina, safidy fandaharana tsotra, ary protocole efa voafaritra mialoha. Mety misy rindrambaiko ahafahana manara-maso sy mamakafaka angon-drakitra amin'ny fotoana tena izy ihany koa ireo modely mandroso, izay tena mahasoa indrindra ho an'ny fampiharana qPCR. Ataovy azo antoka fa mifanaraka amin'ny rafitrao efa misy ny rindrambaiko ary afaka mitantana ny angon-drakitra ilainao.

6. Fiheverana ny teti-bola

Miovaova be ny vidin'ny "thermal cycler", koa zava-dehibe ny fananana teti-bola alohan'ny hividiananao azy. Na dia mety halaim-panahy aza ny misafidy ny safidy mora indrindra, dia diniho ny tombony maharitra amin'ny fampiasam-bola amin'ny milina avo lenta izay mifanaraka amin'ny filanao fikarohana. Tsy ny vidin'ny fividianana voalohany ihany no tokony hodinihina, fa koa ny vidin'ny fitaovana lany, ny fikojakojana ary ny fanavaozana mety hitranga.

7. Fanohanana sy antoka ho an'ny mpanamboatra

Farany, diniho ny haavon'ny fanohanana sy ny antoka omen'ny mpanamboatra. Ny milina fanodinana hafanana azo itokisana dia tokony hanolotra antoka feno ary manana fanohanana ho an'ny mpanjifa amin'ny famahana olana sy ny fikojakojana. Izany dia mitsitsy fotoana sy loharanon-karena amin'ny fotoana maharitra.

raha fintinina

Misafidy ny tsarampitsikilo hafananaNy fanapahan-kevitra lehibe momba ny filànao fikarohana dia mety hisy fiantraikany amin'ny fahombiazan'ny andranao. Amin'ny fandinihana tsara ny zavatra takinao manokana, ny mari-pana, ny endriky ny môdely, ny hafainganam-pandeha, ny interface tsara ho an'ny mpampiasa, ny teti-bola ary ny fanohanan'ny mpanamboatra, dia afaka mandray safidy tsara ianao izay hanatsara ny fahaizanao mikaroka sy hahazo valiny azo antoka kokoa. Ny fandaniana fotoana amin'ity dingana fifantenana ity dia hitondra vokatra tsara amin'ny kalitao sy ny fahombiazan'ny asa siantifika ataonao.