Fahadisoana famakafakana PCR: Fanontaniana sy vahaolana matetika

Ny famakafakana polymerase (PCR) dia fitaovana ilaina amin'ny biolojika molecular, izay mamela ny mpikaroka hanamafisana ny ADN ho an'ny fampiharana amin'ny fikarohana genetika mankany amin'ny diagnostika klinika. Na izany aza, toy ny fitaovana sarotra be dia be, ny mpandinika pcr dia afaka miatrika olana izay misy fiantraikany amin'ny zava-bitany. Ity lahatsoratra ity dia miresaka fanontaniana mahazatraPcr AnalyzerMamaha olana sy manome vahaolana azo ampiharina amin'ny olana iraisana.

1. Fa maninona no tsy manamafy ny fihetsikako PCR?

Ny iray amin'ireo olana mahazatra indrindra amin'ny mpampiasa dia ny tsy fahaizan'ny fihetsiky ny PCR dia hanamafisana ny ADN kendrena. Azo atao amin'ny lafin-javatra maromaro izany:

Famolavolana primer diso: Ataovy azo antoka fa manokana ny primars anao ho an'ny filaharana kendrena ary manana mari-pana tsara indrindra (TM). Ampiasao ny fitaovana rindrambaiko ho an'ny famolavolana Primer mba hialana amin'ny fatorana tsy misy dikany.

Tsy ampy ny dna amin'ny template: Hamarino fa mampiasa dna amin'ny template ampy ianao. Kely dia mety hiteraka malemy na tsy manam-pahaizana.

Ny fanentanana ao amin'ny santionany: ny voaloto ao amin'ny santionany dia afaka manakana ny fihetseham-po PCR. Diniho manadio ny ADN na mampiasa fomba fitrandrahana hafa.

Vahaolana: Zahao ny famolavolana voalohany, mampitombo ny fifantohana modely, ary ataovy azo antoka fa tsy misy ny fanakorontanana ny santionanao.

2. Fa maninona no ny vokatrao PCR no habe diso?

Raha tsy araka ny antenaina ny haben'ny vokatra PCR dia mety misy olana amin'ny toe-piainana na zavatra ampiasaina.

Fomba tsy voafaritra: Mety hitranga izany raha toa ka mamatotra ny toerana tsy misy tohana. Zahao ny mombamomba ny primers amin'ny fitaovana toy ny fipoahana.

Ny mari-pana an-tsokosoko diso: Raha ambany loatra ny mari-pana an-tsokosoko, dia mety hisy vokany tsy voafaritra. Optimization ny mari-pana an-tsokosoko amin'ny alàlan'ny Gradient Pcr.

Vahaolana: Hamarino ny mombamomba ny primer ary optimize ny mari-pana fanatsarana ny fahamarinan'ny vokatra PCR.

3. Ny famakafakana pcr ahy dia mampiseho hafatra diso. inona no tokony hataoko?

Ny hafatra diso amin'ny famakafakana PCR dia mety hampahatahotra, fa matetika izy ireo no afaka manome fanazavana amin'ny olana mety hitranga.

Olana amin'ny calibration: ho azo antoka fa ny famakafakana PCR dia calibrated tsara. Ny fikolokoloana sy ny fisavana calibration tsy tapaka dia zava-dehibe ny fahazoana valiny marina.

Software Group: Indraindray, ny banga rindrambaiko dia mety hiteraka olana. Avereno ny solosainao ary jereo ny fanavaozana rindrambaiko.

Vahaolana: Jereo ny boky torolàlana ho an'ny kaody diso manokana ary araho ny dingana fanaraha-maso. Ny fikojakojana tsy tapaka dia afaka misoroka ny olana maro.

4. Fa maninona no tsy mifanaraka ny fihetseham-poko PCR?

Ny valin'ny PR tsy mitombona dia mety hahakivy noho ny antony maro:

Zava-dehibe ny kalitao: miantoka fa ny reagents rehetra, ao anatin'izany ny anzima sy ny angovo, buffers ary DNTP, dia vaovao sy kalitao avo lenta. Ny reagents efa lany daty na voaloto dia mety hiteraka fiovana.

Ny calibration cilibration mafana kokoa Hamarino tsy tapaka ny calibration ny cycler mafana thermal.

Vahaolana: Ampiasao ny reagents avo lenta ary manorata tsy tapaka ny mpiasan'ny thermal tsy tapaka mba hiantohana ny valiny tsy miova.

5. Ahoana no hanatsarana ny fahombiazan'ny fanalefahana PCR?

Ny fanatsarana ny fahombiazan'ny fanehoan-kevitra PCR dia mety hiteraka vokatra avo kokoa sy valiny azo itokisana kokoa.

Fomba fanehoan-kevitra: fanandramana amin'ny alàlan'ny fifantohana samihafa amin'ny Primers, ny DNA ary MGCL2. Ny fanehoan-kevitra tsirairay avy dia mety mitaky toe-javatra tsy manam-paharoa amin'ny fampisehoana tsara indrindra.

Ampiasao ny angovo avo indrindra: Raha manakiana ny fahitsiana dia eritrereto ny fampiasana polymerase ADM avo lenta mba hanamaivana ny hadisoana mandritra ny amplification.

Vahaolana: Manatanteraka fanandramana optimization hahitana ny toe-javatra tsara indrindra ho an'ny fananganana pcr manokana.

Raha fintinina

Mamaha olana aPcr AnalyzerMety ho asa mahatahotra, fa ny fahazoana ireo olana iraisana sy ny vahaolana aminy dia afaka manatsara ny traikefanao PCR. Amin'ny famahana ireo olana iraisana ireo, ny mpikaroka dia afaka manatsara ny valin'ny PCR ary miantoka ny valiny azo itokisana amin'ny fampiharana biolojia molekiola. Ny fikojakojana tsy tapaka, ny fifidianana amim-pitandremana, ary ny fanamafisana ny toe-javatra mihetsika dia fanalahidin'ny famakafakana PCR mahomby.