Torolàlana momba ny siansa amin'ny fahavaratra: Rehefa mihaona amin'ny andrana molekiola ny onjan'ny hafanana 40°C

Nitohy hatrany ny maripana ambony manerana an'i Shina tato ho ato. Tamin'ny 24 Jolay, namoaka fanairana mavo ny maripana avo lenta ny Observatoire Meteorological Faritanin'i Shandong, izay maminavina ny maripana “tahaka ny sauna” 35-37°C (111-133°F) ary hamandoana 80% mandritra ny efatra andro manaraka any amin'ny faritra afovoan-tany. Manakaiky ny 48°C (111-133°F) ny mari-pana any amin'ny toerana toa an'i Turpan, Xinjiang. Wuhan sy Xiaogan, Hubei, dia eo ambanin'ny fanairana voasary, miaraka amin'ny maripana mihoatra ny 37°C any amin'ny faritra sasany. Ao anatin'io hafanana mahamay io, ny tontolon'ny bitika ambany ambanin'ny pipettes dia miaina fikorontanana tsy mahazatra - ny fahamarinan'ny asidra nokleika, ny asan'ny enzymes, ary ny toe-batana ara-batana dia voahodidin'ny onja mafana.

Ny fitrandrahana asidra nokleika dia lasa hazakazaka manohitra ny fotoana. Rehefa mihoatra ny 40°C ny mari-pana any ivelany, na dia eo aza ny fanamafisam-peon'ny rivotra, dia matetika mihoatra ny 28°C ny hafanan'ny latabatra fandidiana. Amin'izao fotoana izao, ny santionan'ny ARN tavela eny an-kalamanjana dia miharatsy avo roa heny noho ny amin'ny lohataona sy ny fararano. Ao amin'ny fitrandrahana vakana andriamby, ny vahaolana buffer dia tototry ny eo an-toerana noho ny famotsorana haingana ny solvent, ary ny kristaly dia mora vaky. Ireo kristaly ireo dia hiteraka fiovaovana lehibe amin'ny fahombiazan'ny fisamborana asidra nokleika. Mitombo miaraka ny volatility ny solvents organika. Amin'ny 30 ° C, mitombo 40% ny habetsahan'ny volatilization chloroform raha oharina amin'ny 25 ° C. Mandritra ny fandidiana dia ilaina ny miantoka fa ny hafainganam-pandehan'ny rivotra ao amin'ny setroka dia 0,5m / s, ary mampiasa fonon-tanana nitrile mba hitazonana ny fahombiazan'ny fiarovana.

Ny fanandramana PCR dia miatrika fikorontanan'ny mari-pana sarotra kokoa. Reagents toy ny Taq enzyme sy reverse transcriptase dia tena saro-pady amin'ny fiovaovan'ny hafanana tampoka. Ny condensation eo amin'ny rindrin'ny fantsona rehefa nesorina tao amin'ny vata fampangatsiahana -20°C dia mety hiteraka fatiantoka mihoatra ny 15% ny asan'ny enzyme raha miditra ao amin'ny rafitra fanehoan-kevitra. Ny vahaolana dNTP dia afaka mampiseho fahasimbana azo tsapain-tanana ihany koa aorian'ny fiposahan'ny hafanana mandritra ny 5 minitra amin'ny mari-pana (>30°C). Voasakantsakan'ny hafanana ambony koa ny fiasan'ny fitaovana. Raha mihoatra ny 35 ° C ny mari-pana ao amin'ny laboratoara ary tsy ampy ny fivoahan'ny hafanana amin'ny fitaovana PCR (<50 sm avy amin'ny rindrina), dia mety hahatratra hatramin'ny 0,8 ° C ny hafanana anatiny. Ity fiviliana ity dia mety hahatonga ny fahombiazan'ny fanamafisam-peo eo amin'ny sisin'ny takelaka 96-well hidina mihoatra ny 40%. Tokony hodiovina tsy tapaka ny sivana vovoka (mihena 50%) ny fivondronan'ny vovoka, ary tokony hialana amin'ny rivotra mivantana. Fanampin'izay, rehefa manao andrana PCR mandritra ny alina, dia ialao ny fampiasana ny fitaovana PCR ho toy ny vata fampangatsiahana natao hitahirizana santionany. Ny fitehirizana amin'ny 4°C mandritra ny adiny 2 mahery dia mety hiteraka fiforonan'ny condensation rehefa mikatona ny sarony mafana, manalefaka ny rafitra fanehoan-kevitra ary mety hanimba ny maody metaly ny fitaovana.

Manoloana ny fampitandremana maharitra amin'ny maripana ambony, ny laboratoara molekiola dia tokony hampaneno ny fanairana. Ny santionan'ny ARN sarobidy dia tokony hotehirizina ao ambadiky ny vata fampangatsiahana -80°C, ary voafetra ny fidirana amin'ny vanim-potoana mafana. Ny fanokafana ny varavaran'ny vata fampangatsiahana -20°C mihoatra ny in-dimy isan'andro dia hampitombo ny fiovaovan'ny mari-pana. Ny fitaovana mamokatra hafanana be dia mila 50 sm farafahakeliny ny elanelana misy hafanana eo amin'ny andaniny roa sy aoriana. Fanampin'izay, soso-kevitra ny handrafitra indray ny fotoana andrana: 7:00-10:00 AM ho an'ny asa mora saro-pady toy ny fitrandrahana RNA sy ny fametrahana qPCR; 1:00-4:00 PM ho an'ny asa tsy misy fanandramana toy ny fanadihadiana angona. Ity paikady ity dia afaka misoroka amin'ny fomba mahomby ny fiakaran'ny maripana ambony tsy hanelingelina ireo dingana manakiana.

Ny fanandramana molekiola mandritra ny onja mafana dia fitsapana ny teknika sy ny faharetana. Eo ambanin'ny masoandron'ny fahavaratra tsy mitsahatra, angamba izao no fotoana hametrahana ny pipette anao ary asio baoritra ranomandry fanampiny amin'ny santionany mba hamelana ilay fitaovana hamoaka hafanana bebe kokoa. Io fanajana ny fiovaovan’ny mari-pana io indrindra no toetra sarobidy indrindra amin’ny laboratoara mandritra ny vanin-taona mahamay — raha ny marina, amin’ny hafanana 40°C amin’ny fahavaratra, na ny molekiola aza dia mila “faritra polar artifisialy” voaaro tsara.